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GF BM-MALARIA OBJETIVOS ESPECIFICOS   Subproyecto: Identificación de genes relevantes para el desarrollo de vacunas contra agentes patógenos parasitarios y bacterianos.     METODOLOGIA   Consiste en el estudio del polimorfismo, con el proceso de amplificación de los fragmentos 1 y 2 de PvRAP1 a partir de ADN extraído de muestras de pacientes infectados con P. vivax, así como la recolección adicional de más aislados clínicos.

Para el estudio de identificación de nuevos antígenos, se esta desarrollando una metodología que permita llevar a cabo la caracterización de proteínas pertenecientes a la superficie, en el caso de MSP7, o a las roptrias de los merozoitos, como RhopH3, que han sido previamente caracterizadas en P. falciparum. En el estudio de expresión de proteínas recombinantes, para establecer la inmunogenicidad de un segmento recombinante de la proteína de unión a reticulocitos 1 de P. vivax en monos Aotus nancymaae, junto con las condiciones apropiadas para la expresión y purificación de la proteína MSP-10, la cual va a ser utilizada para inmunizar monos con el fin de establecer el grado de protección conferido ante reto experimental con la cepa VCG-1 de P. vivax. Así mismo, en el estudio de identificación de epítopes universales, con el fin de identificar epítopes de células T helper que puedan interactuar promiscuamente con un amplio rango de moléculas HLA-DR, en el laboratorio de cultivo celular del FIDIC se están cultivando líneas celulares B humanas homocigotos transformadas con el virus de Epstein Barr, las cuales serán purificadas para obtener las moléculas (HLA-DRB1*0101, HLA-DRB1*0401, HLA-DRB1*0701 y HLA-DRB1*1101)

Identificación de genes relevantes para el desarrollo de vacunas contra agentes patógenos y >> Ver más ..   Para el desarrollo de los objetivos 1, 2 y 3 esta organizado en tres subproyectos   >> Ver más ..

que permitirán la posterior realización de los ensayos de unión in vitro a péptidos de la proteína de unión a Duffy de P. vivax (PvDBP). El programa de predicción de epítopes SYFPEITHI que permite determinar un posible registro de residuos de anclaje del péptido a una molécula HLA clase II (HLA-DR) será utilizado y las predicciones serán comparadas frente a los resultados que se obtendrán en los ensayos de unión. Por último, en el estudio del receptor de la célula T, se tipificaran y escogerán los monos Aotus para los grupos de inmunización y se han tomado las muestras preinmunes. A las muestras colectadas se les ha realizara la separación de linfocitos y extracción de RNA.

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