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02-GF RECEPTOR-LIGANDO
OBJETIVOS ESPECIFICOS
  Determinación de las regiones de unión a células blanco, derivadas de proteínas de Plasmodium falciparum y su posible papel en el proceso de invasión
   
METODOLOGIA
  En lo que respecta al Objetivo 4 la metodología a seguir se basa en la identificación de las regiones de unión y por lo tanto las proteínas de las cuales se derivan estas regiones, pueden estar involucradas en el proceso de invasión de cada uno de los patógenos a sus respectivas células hospederas.
  Con la reciente publicación de la secuencia del genoma de Plasmodium falciparum y las diferentes publicaciones acerca de la proteomica del parásito; el GF Receptor-Ligando ha este objetivo como su principal línea de acción para determinar y establecer la función biológica de diferentes proteínas codificadas en este genoma.

La identificación de proteínas putativas de membrana mediante el uso de algoritmos junto con la metodología planteada y desarrollada en este proyecto permitirá seleccionar algunas proteínas y a su vez determinar los fragmentos derivados de ellas que se unan a eritrocitos.

La utilización de esta aproximación permitirá la selección de nuevos fragmentos o secuencias peptídicas que podrían ser usadas en el diseño de una nueva generación de vacuna contra la malaria.
Par lo anterior se realizará el radiomarcaje con 125-I a residuos de Tirosina de los diferentes péptidos sintetizados para el estudio. Con estos péptidos se realizaran ensayos de unión a células blanco, como son glóbulos rojos o hepatocitos, dependiendo de cual sea el banco empleado por el parásito para invadir.

Se balizaran ensayos de entrecruzamiento molecular por SDS-PAGE y autoradiografías para monitorear la naturaleza de los potenciales receptores moleculares de las células blanco y finalmente se sintetizaran análogas a manera de scanning con residuos de glicina para realizar con ello ensayos de inhibición competitiva de la unión de las secuencias nativas y a si determinar los residuos críticos para la unión de un fragmento peptídico dado a sus células blanco.

Identificación de genes relevantes para el desarrollo de vacunas contra agentes patógenos y
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Para el desarrollo de los objetivos 1, 2 y 3 esta organizado en tres subproyectos
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Se realizaran ensayos del tipo receptor-ligando que permitan también determinar que péptidos derivados de la proteína TALRP de M. tuberculosis presentan alta capacidad de unión a células A54915  (modelo celular de macrófagos alveolares).


Se inocularan cabros con péptidos derivados de las proteínas PFB0535w, PFB0845w, PFB0790c, PFB0780c, PFB0735c, PFB0910w y NP_473349.1.1 para evaluar sus propiedades inmunologicas.
En colaboración con el GF Biología Molécula-Tuberculosis se inocularan nuevas proteínas hipotéticas de membrana.
GF-QUIMICA SINTESIS | GF-RECEPTOR LIGANDO | GF-RMN DISEÑO MOLECULAR | GF-BIOCATALISIS
 

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